TMT (Q)
Overview
串联质谱标签 (TMT) 是一种同量异序化学标签，为相对蛋白质组学定量分析提
供了多通路功能。它能对多个样品并行执行质谱法 (MS) 分析，从而增加了通
量，并且能够同时对最多达 18 个不同的细胞、组织或生物体液样品进行相对
定量分析。标签由 MS/MS 报告基团、间隔臂和胺反应性基团组成。在标记期
间，胺反应性基团结合到肽的 N 末端或赖氨酸残基。
在相对定量分析实验中，不同的同量异位标签被用来标记不同的系统条件。标
记之后，混合所有样品并在单个液相色谱-质谱 (LC-MS) 实验中进行分析。同
量异位标签具有相同的化学性质，因此在 LC 分离过程中，来自不同 TMT 标记
样品的所有肽都会发生共洗脱。这些肽进入质谱仪后，就会同时被检测为单个
且不可区分的前体离子峰。碎裂之后，各个系统条件的标签将在 MS/MS 谱的低
m/z 区生成一个具有独特特征的报告离子。蛋白质鉴定是通过将产生的碎片离
子峰与片段数据库中提供的离子峰进行匹配来实现的。通过比较报告离子的强
度即可完成肽类定量分析。
Technical process
提取蛋白后采用高特异性 Trypsin，LysC 等蛋白酶进行酶切反应获取 peptide 混 合物。对同一批待检测样本进行 TMT 标记，完成标记后采用 Nano LC-MS/MS 获 取高质量谱图。再使用专用软件对质谱数据进行 database search，并利用 MS/MS 谱图结果进行定量分析，最后依据实验样本、实验目的等进行生物信息学分析。
Steps Involved
- 技术支持人员确认需求
- 样本寄送
- 酶切实验
- 质谱检测
- 数据分析
- 出具报告
项目交付周期为14 - 21 个工作日
Sample requirement
蛋白溶液形式：蛋白量不低于 50 μg，浓度不低于 0.5μg/μL，溶液不能含有NP40, Triton, X-100等去污剂。
组织、细胞、体液、粪便等其他样本形式请咨询技术人员。
Deliverables
出具正式报告，报告实验过程、PTMs 类型位点修饰比例等信息，依据实验目的可提供包括 Peptide
mapping、差异表达分析、Gene
Ontology、protein-protein interaction 以及 KEGG
pathway 等各种定制化分析结果。