Shotgun Proteomics
Overview
Shotgun proteomics 采用 “bottom-up” 策略对待研究体系的全部蛋白(例如细胞、
组织、体液以及 SDS-PGE 胶条等体系中的蛋白质)进行分析,即通过蛋白酶酶
切、脱盐、Nano 液相色谱法分离肽段、再利用超高分辨串联质谱鉴定肽段,最
后采用软件算法进行定性与定量分析。Shotgun proteomics 具备全局蛋白质鉴定
和系统描绘动态蛋白质组的能力,这一方法在研究蛋白质组学中得到广泛应用,
为深入理解复杂生物体系的蛋白质组成和功能提供了有效手段。
Technical process
提取蛋白后采用高特异性Trypsin,LysC等蛋白酶进行酶切反应获取peptide混合物。Peptide脱盐处理后采用Nano LC-MS/MS获取高质量谱图。再使用专用软件对质谱数据进行database search,再结合统计学验证完成不同样本的定量分析,最后依据实验样本、实验目的等进行生物信息学分析。
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Steps Involved
- 技术支持人员确认需求
- 样本寄送
- 酶切实验
- 质谱检测
- 出具报告
项目交付周期为14 - 21 个工作日
Sample requirement
蛋白溶液形式:蛋白量不低于 50 μg,浓度不低于 0.5μg/μL,溶液不能含有NP40, Triton, X-100等去污剂。
胶条形式:考马斯亮蓝染色后条带清晰可见。
组织、细胞、体液、粪便等其他样本形式请咨询技术人员。
Deliverables
出具正式报告,报告实验过程、定性定量结果,依据实验目的可提供包括 Peptide mapping、差异表达分析、Gene
Ontology、protein-protein interaction 以及 KEGG
pathway 等各种定制化分析结果。