Sequencing (mapping)
Overview
与大多数生物治疗药物一样,序列分析也是 mRNA 药物的一个关键质量属性(CQA)。对于核酸分析,LC-MS 作为 Sanger 和 NGS 的正交方法,与传统测序技术相比具有独特的优势:可直接对核酸样品进行分析(无需扩增等处理步骤);更高的检测灵敏度(直接检测低水平的序列变异体或修饰杂质(<1%丰度),且只需少量样品);更短的分析时间;可直接检测修饰核苷酸、自动识别修饰位点、种类和含量;避免传统测序过程中造成的碱基错误匹配。
Technical process

核酸 mapping 分析流程包括前处理、液相分离、质谱检测、数据分析。由于核酸仅有 4 个特定碱基,在组合形式上远小于蛋白序列,因此会有多个重复序列片段,需要酶解成较长的片段(通常大于 15nt)以得到可用于序列覆盖的特征片段。此外核酸样品极不稳定,非常容易降解。基于此需求,我们在前处理上需要选择特异性较强的酶,并且减少酶解时间,得到具有漏切位点的较长片段。

Steps Involved
  • 技术支持人员确认需求
  • 样本寄送
  • 实验
  • 质谱检测
  • 数据分析
  • 出具报告

项目交付周期为 7 - 14 个工作日

Sample requirement
  • 详情请咨询技术人员
Deliverables
出具正式报告,内容包括实验过程与完整mapping结果等。
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