5' capping efficiency
Overview
在真核生物中,成熟的 mRNA 分子的 5 '端通常有一个鸟苷类似物构成的帽子修 饰结构。5 '帽子结构对 mRNA 分子的稳定性及生物学功能具有重要的作用。为 了保证 mRNA 药物的治疗效果,降低其免疫原性,人们利用化学合成等方法开 发了不同的 5 '帽子类似物,并将其应用到 mRNA 分子修饰中。然而,在 mRNA 的生产制造过程中,难以确保每个 mRNA 分子都能被 5 '帽结构修饰。因此,加 帽率已成为 mRNA 药物的一个关键质量属性。
Technical process

本服务采用 M. Beverly 及其同事提出的非标记加帽率分析法,对待分析 mRNA 样品的加帽率进行分析。该方法大致包含以下几个步骤,首先在 Biotin 标记探针 的引导下,mRNA 分子的 5 '端被 RNase H 切割。之后用 Streptavidin 磁珠分离纯 化酶切产物,然后进行液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析。最后利用去卷积算法 分析质谱图所对应的分子质量,进而对 mRNA 分子 5 '端的不同结构进行识别和 定量,最终得出待分析样品加帽率。

Steps Involved
  • 技术支持人员确认需求
  • 样本寄送
  • 实验
  • 质谱检测
  • 数据分析
  • 出具报告

项目交付周期为 7 - 14 个工作日

Sample requirement
  • 详情请咨询技术人员
Deliverables
出具正式报告,内容包括实验过程、加帽率等。