2 to 8℃避光保存，有效期1年。

1. 使用前，请将mIHC抗体洗脱液平衡至室温。

2. 常规2.4 × 2.4 cm²大小切片，滴加2-3滴（约100μL）洗脱液完全覆盖样本，室温或37℃孵育15-20分钟。

3. 3.洗脱完成后，再用PBS清洗1-3次。

1. 如何判断抗体是否洗脱完全？

   抗体洗脱后，使用DAB染色;若靶标位置出现明显棕色沉淀物，则提示抗体洗脱不完全，需优化抗体洗脱条件。

2. 抗体洗脱不完全时，如何优化洗脱条件？

    可在37℃条件下孵育洗脱，或延长孵育时间。也可采用多次洗脱。

3.对于不同亚细胞定位蛋白的抗体，如何优化洗脱条件？

    针对不同亚细胞定位的抗体，其洗脱难度各不相同。优化洗脱条件时，主要考虑孵育温度、孵育时间，以及洗脱次数等因素。对于一些常见的不同亚细胞定位蛋白的抗体，可参考表1中给出的推荐洗脱条件。

4. 在酪胺信号放大 (TSA) 多重免疫荧光实验中，抗体洗脱液是否会影响荧光信号强度?

    一般情况下，抗体洗脱液与TSA实验兼容，不会对靶标信号产生明显影响。但对于低丰度靶标，抗体洗脱后可能出现荧光信号强度减弱的现象。这是因为靶标数量少，酪胺染料的共价结合位点有限，部分染料会与抗体结合，在洗脱过程中被一同去除，从而导致信号降低。在多重免疫荧光实验中，建议将低丰度靶标的染色步骤安排在最后进行。

5. 抗体洗脱液是否会破坏组织形态或抗原表位?

    抗体洗脱液配方温和，通常不会破坏组织结构及抗原表位。

6. 抗体洗脱液如何实现在温和条件下洗脱抗体?

    抗体洗脱液主要通过削弱或破坏抗原与抗体之间的非共价相互作用(如氢键、静电作用等)来实现抗体的温和洗脱。

7. 抗体洗脱液是否会影响DAPI染色信号?

    抗体洗脱液在使用过程中可能会洗脱少量DAPI，导致染色信号减弱。建议在抗体洗脱后再进行DAPI染色，或在观察到信号减弱时重新染色。